Ademas, se evaluo el efecto de la coexpresion con el gen SUMF1, mediante la coadministracion de AAV-GALNS con el vector AAV-SUMF1.
El plasmido pAAV-CMV-SUUMF1 se construyo remplazando el ADNc de GALXS en pAAV-CMV-GALNS, por el fragmento EcoRI de 1,2 kb, correspondiente al gen de SUMF1 humano, obtenido mediante digestion del plasmido pCXN-SUUMF1.
280] para una preparacion sin particulas vacias, el cual corresponde a 1,4578; 1,4707 y 1,4464 para las soluciones virales AAV2, AAV-GALNS y AAV SUMF1, respectivamente.
Sin embargo, la coexpresion con SUMF1 en una relacion 1:1 llevo a un leve incremento en la actividad (figura 4A).
Un incremento adicional de 1,5 veces se observo cuando se empleo la relacion GALNS: SUMF1 1:2.
A diferencia de los resultados obtenidos en celulas HEK293 y fibroblastos, la co-transfeccion con SUMF1 no tuvo efecto sobre la actividad GALNS en ellisado celular.
Ademas, se evaluo el efecto de la co-transfeccion con un vector portando el gen humano de SUMF1.
Desde el descubrimiento y aislamiento del gen SUMF1, el cual codifica para la enzima activadora de sulfatasas o enzima generadora de formilglicina, y su asociacion con la deficiencia multiple de sulfatasas, la coexpresion con SUMF1 ha mostrado ser de gran importancia, tanto en la produccion de enzimas para terapia de remplazo enzimatico, como en el tratamiento de estas enfermedades mediante terapia genica [42, 43].
42) reportaron un incremento de 16, 3, 1,5 y 2 veces en la actividad de arilsulfatasa A en celulas CCOS-7, hepaticas, HEK293 y U2OS (linea celular de osteosarcoma), respectivamente, cotransfectadas con vectores derivados del virus del herpes simplex, que portaban los genes de arilsulfatasa A y SUMF1.
22] en el cual se evaluo el efecto de la coexpresion de SUMF1 sobre 5 sulfatasas, empleando vectores lentivirales y virus adenoasociados en fibroblastos de leucodistrofia metacromatica, condrodisplasia punctata ligada al X, y mucopolisacaridosis II, III y VI.
